[硕士论文] IBV分离株部分S1蛋白基因的序列分析及致病性试验 [复制链接]

资料简介：
硕士论文-IBV分离株部分S1蛋白基因的序列分析及致病性试验，共69页，25170字

摘 要

1、参考 Genbank 上的 IBV S1 基因序列，自行设计合成了一对跨幅约 0.6kb 的

引物。利用 RT-PCR 对 9 株 IBV 分离株 RNA 进行 RT-PCR 扩增，将其克隆到 pMD18-T

Vector 进行序列测定。用分子生物学软件对本试验测定的基因序列同 GenBank 上已

公布的参考毒株基因序列进行同源性比较。序列分析显示，这些病毒从时间、空间

和组织嗜性都没有明显的规律可循。另 2 株从病鸡中获得病毒（ZC4-3 株和 DB239-1

株）属于既不同于国内其它分离毒株，又不同于国际参考毒株的独立一群。

2、SPF 鸡的致病性试验：从 9 株流感病毒中挑选出 3 株（D-2 株，ZC4-3 株和

DB239-1 株）用于鸡的感染性试验。将 15 只 6 周龄 SPF 鸡随机分成 3 组，5 只/组，

采用滴鼻点眼和肌肉注射接种方式，接种量为 4.5ml/只，另设对照组 4 只鸡，接种

同量的蒸馏水。试验过程中共计死亡 3 只鸡，剖检死鸡，进行 RT-PCR,可见目的条

带。

关键词： 传染性支气管炎病毒；S1 基因；序列发生进化关系；SPF 鸡；致病

性

目 录

摘要………………………………

英文摘要…………………………

缩略词表…………………………

前言………………………………

文献综述…………………………

1 病原学……………………………

2 病原的生物学特征………………

3.病毒分子生物学研究进展……

4.IBV 的分型方法………………

5.致病性…………………………

试验内容

1 传染性支气管炎病毒的序列分析…………………………………

1.1 材料与方法…………………

1.1.1 材料…………………………

1.1.2 方法………………………

1.2 结果……………………………

1.2.1 各分离株 RT-PCR 扩增结果

1.2.2 菌液 PCR 鉴定结果…………

1.2.3 IBV 分离株核苷酸序列比较

1.2.4 IBV 分离株和参考株核苷酸序列比较…………………………

1.3 讨论…………………………

1.3.1 …………………………

1.3.2 扩增片段的选择…………

附图………………………………

2 不同群内分离株对鸡的致病性试验……………………

2.1 材料与方法…………………

2.1.1 材料………………………

2.1.2 方法………………………

2.2 结果…………………………

2.2.1 HA 测定结果………………

2.2.2 发病和死亡统计…………

2.2.3 剖检病理变化……………

2.2.4 RT-PCR 扩增结果………

2.3 讨论………………………

2.3.1 ……………………………

2.3.2 对 IBV 防疫的思考………

全文总结…………………………

参考文献…………………………

致谢………………………………

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