[硕士论文] 盐酸克仑特罗对小鼠的肝脏损伤机制及其免疫毒理学研究 [复制链接]

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硕士论文-盐酸克仑特罗对小鼠的肝脏损伤机制及其免疫毒理学研究，共55页，33936字

摘 要

本试验以雄性昆明小鼠为试验动物,随机分为高、中、低三个剂量组和 1 个对照组,

每日经口灌胃，30d 后对小鼠进行肝脏损伤和免疫毒性研究.

1.试验 30d 后观察小鼠体重及日常行为、精神状态,测定小鼠肝脏脏器系数、丙二醛

（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-PX）、丙氨酸氨基转

移酶（ALT）、天门冬氨酸氨基转移酶（AST）、碱性磷酸酶（ALP）、一氧化氮（NO）、

一氧化氮合酶（NOS）活性，并通过对小鼠肝脏进行病理学观察，来研究了盐酸克仑特

罗对肝脏损伤的影响。

试验结果表明：（1）经盐酸克仑特罗染毒动物体重变化无统计学意义；饲喂过程中，小

鼠会出现呼吸加深加快、动作行为表现烦躁及肌肉震颤等现象；

（2）小鼠肝脏脏器系数、血清 AST 和 ALT 的含量与对照组相比显著降低；并且随着

剂量的增加，小鼠对血清生化指标的影响逐渐增加。

（3）小鼠肝脏组织悬液中指标测定结发现，小鼠 MDA 的含量与对照组相比显著升高，

SOD 和 GSH-PX 含量与对照组相比显著下降，炎性因子 NO 和 NOS 含量与对照组相比

显著上升，并且盐酸克仑特罗的各项指标具有剂量相关性。

（4）病理学观察发现盐酸克仑特罗对小鼠的肝脏造成一定程度损伤，并且随着剂量的

增加，盐酸克仑特罗对小鼠肝脏损伤作用逐渐增加。

2.试验 30d 后，选用免疫器官脏器系数的测定、溶血空斑试验、巨噬细胞吞噬功能测定、

淋巴细胞转化率试验、免疫球蛋白的测定、血细胞计数等研究，分别从体液免疫、细胞

免疫和非特异性免疫等不同角度研究进行小鼠的免疫毒性。

结果表明，（1）盐酸克仑特罗对小鼠胸腺的脏器系数与对照组相比显著降低。

（2）盐酸克仑特罗未引起小鼠白细胞总数的变化，但能显著降低小鼠的淋巴细胞比率

和中值细胞比率，提高小鼠中性粒细胞比率。

（3）小鼠溶血空斑指数、淋巴细胞转化率、免疫球蛋白的含量和巨噬细胞吞噬指数显

著低于对照组，并且与剂量成正相关性。结果提示，盐酸克仑特罗对小鼠的免疫功能有

一定的抑制作用。

关键词：盐酸克仑特罗；小鼠；肝脏；损伤；免疫毒性

目录

摘要……………ⅰ

Abstract…ⅲ

缩略符号………ⅳ

前言………… 1

文献综述…… 1

试验一 盐酸克仑特罗对小鼠肝脏损伤机制的研究……12

1 材料…………12

1.1 试验动物….12

1.2 药物与设备.12

1.3 试剂或溶液12

2 方法…………13

2.1 试验分组及处理….………………13

2.2 小鼠临床症状及体重变化的观察………….……………14

2.3 脏器系数的测定………………….14

2.4 血清中 ALT、AST 和 ALP活力测定……………………..14

2.5 肝脏中 MDA、SOD 和 GSH-PX 活力测定……………….14

2.6 肝脏中炎症相关因子的测定…….15

2.7 肝脏组织病理学观察…………….15

2.8 数据处理….16

3 结果与分析…16

3.1 小鼠临床症状及体重变化 ……16

3.2 肝脏脏器系数变化……………….16

3.3 血清中 ALT、AST 和 ALP 活力测定……………………17

3.4 肝脏中 MDA、SOD 和 GSH-PX 活力测定 ……………17

3.5 肝脏中 NO 和 NOS活力测定…….18

3.6 肝脏病理学观察………………….18

4 讨论…………19

4.1 盐酸克仑特罗对小鼠体重及临床症状的影响….………19

4.2 盐酸克仑特罗对小鼠脏器系数的影响….………………19

4.3 盐酸克仑特罗对小鼠血清生化指标的影响….…………19

4.4 盐酸克仑特罗对小鼠肝脏组织悬液中生化指标的影响….……………………20

4.5 盐酸克仑特罗对小鼠肝组织病理变化的影响 ………22

试验二 盐酸克仑特罗对小鼠免疫毒性的研究 ……………24

1 材料…………24

1.1 试验动物….24

1.2 仪器与设备.24

1.3 试剂及溶液的配制………………24

2 方法…………25

2.1 试验分组…25

2.2 脏器系数的测定………………26

2.3 血常规测定…………………….26

2.4 溶血空斑试验………………….26

2.5 血清球蛋白含量测定 …………...27

2.6 巨噬细胞吞噬功能测定…………27

2.7 淋巴细胞转化率试验…………….27

2.8 数据处理…28

3 结果与分析…28

3.1 小鼠脏器系数测定结果…………28

3.2 小鼠血常规测定结果…………….28

3.3 小鼠溶血空斑和吞噬功能测定结果 ………………..29

3.4 小鼠球蛋白含量测定结果………29

3.5 小鼠淋巴细胞转化功能测定结果……………………30

4 讨论…………30

4.1 盐酸克仑特罗对小鼠免疫器官脏器系数的影响………30

4.2 盐酸克仑特罗对小鼠血常规的影响……………………31

4.3 盐酸克仑特罗对小鼠溶血空斑和巨噬细胞吞噬功能的影响……………….31

4.4 盐酸克仑特罗对小鼠免疫球蛋白的影响………………32

4.5 盐酸克仑特罗对小鼠淋巴细胞转化率的影响………32

结论…………33

参考文献……34

附页…………39

致谢………42

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