[硕士论文] 山东省禽源大肠杆菌抗药性监测及药敏试验方法的改进研究 [复制链接]

资料简介：
硕士论文-山东省禽源大肠杆菌抗药性监测及药敏试验方法的改进研究，共56页，32682字

中文摘要

药敏试验是精确用药，保障疗效的必要方法。

采用 NCCLS（2007 年，第十七版）抗生素最低抑菌浓度（MIC）微量稀释法分析

了 2007～2008 年度山东省禽养殖场 692 株大肠杆菌分离株对 15 种抗生素的敏感性。结

果表明，山东省禽源大肠杆菌对抗菌药已存在严重的抗药性，对氨苄西林、恩诺沙星、

环丙沙星、诺氟沙星、磺胺二甲嘧啶和利福平的抗药性频率均超过 96%，只对极少数的

抗菌药物如阿米卡星、硫酸粘菌素敏感。分离菌株呈现多重抗药现象，抗药谱集中在

10-14 抗。广谱高抗菌株直接威胁动物和饲养员治疗安全，并可能通过食物链构成公共

卫生隐患。

基于琼脂稀释法，设计制作了 96 点阵抗生素药敏检测盒，以微量稀释法测定的 MIC

为对照，测定了 98 株大肠杆菌对恩诺沙星、环丙沙星、诺氟沙星和中药三黄汤的最低

杀菌浓度（MBC）。结果表明，两种方法测定的 MBC、MIC 都表现高度对称，其差值

的平均值都在一倍稀释度内，在差值 0.5μg/ml 范围内都达到 90%以上的符合。MBC 与

MIC 高度相关，r=0.94-0.99。表明两种方法测定的 MBC 与 MIC 平行性好。以总体的抗

生素敏感性频率比较，两种方法测定值也很相近，符合率为 93.93%。本检测盒还可以

准确测定中药三黄汤对大肠杆菌的 MIC。96 点阵抗生素药敏检测盒是适合于实验室进

行大规模抗药性监测的新工具，具有简易、准确、快速、大通量、节约的优点。

杀菌力是抗生素浓度、培养时间、细菌生理状态等变量的多元函数。传统方法只针

对药物浓度，无法表征多因素的协同作用，本文测定了 GEN 和 ENR 对 E. coli CVCC249

的杀菌效力，用等效线图分别表征不同“生理阶段-药物浓度”下菌群对 GEN 和 ENR 敏

感性、不同“作用时间-药物浓度”下不同接种量菌群对 GEN 的药物敏感性。等效线图分

析二变量杀菌动力学，可以直观而真实地看到二变量对细菌残存率各自作用趋势及其共

同作用效果，更透彻地分析抗生素抑菌杀菌行为。因此对于传统药敏方法的校正、以及

新药评价是很有效的方法。

关键词：大肠杆菌；抗药性监测；96 点阵抗生素药敏检测盒；等效线图

目 录

中文摘要 ................ 1

英文摘要 ................ 2

符号缩略词表 ........ 4

文献综述 ................ 5

1 大肠杆菌抗药性研究进展.. 5

2 抗药性监测方法 7

3 选题的目的意义 ............... 12

试验一 2007～2008 年度山东省禽养殖场大肠杆菌抗药性监测 ......... 14

1 材料与方法 ...... 14

2 结果与分析 ...... 17

3 讨论 . 19

4 小结 . 21

试验二 大通量 96 点阵 MBC 药敏检测盒的设计及应用 .... 21

1 技术背景 .......... 22

2 96 点阵 MBC 药敏检测盒设计.......... 23

3 96 点阵 MBC 药敏检测盒的应用（与 96 孔板微量稀释法做对照试验） ........ 25

4 小结 . 31

试验三 等效线法评价二变量药效动力学............ 32

1 材料与方法 ...... 33

2 结果与分析 ...... 34

3 讨论 . 42

4 小结 . 44

论文总体结论和后续研究展望............. 45

参考文献 .............. 47

硕士期间发表文章 ............... 51

致 谢 ... 52

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