[硕士论文] 咪唑苯脲缓释剂制备及其对牛温氏附红细胞体病治疗的研究 [复制链接]

资料简介：
硕士论文-咪唑苯脲缓释剂制备及其对牛温氏附红细胞体病治疗的研究，共89页，48865字

摘要

选择发热、贫血、黄疸症状明显的奶牛，通过鲜血压片、血液涂片染色镜检和电镜

观察等方法对温氏附红细胞体形态学、运动学和染色特性等生物学特性进行研究。结果

表明：鲜血压片后光镜下观察，温氏附红细胞体向任意方向作翻转、扭转运动。姬姆萨

氏染色和瑞氏染色后光镜下观察，红细胞分别被染成蓝色和粉红色，附着在红细胞上的

温氏附红细胞体都被染成紫红色，且具有折光性；改良瑞氏染色后光镜下观察，红细胞

被染成深紫色，温氏附红细胞体被染成紫红色；吖啶橙染色后荧光显微镜下观察，红细

胞为暗绿色，温氏附红细胞体为发明亮荧光的绿色小体；电镜观察，温氏附红细胞体呈

球状、饼状、卵圆形等多种形态，直径为 0.3~0.8μm，通过纤毛附着在红细胞表面，并

使红细胞膜形成小孔。对同一病例，根据温氏附红体的运动学以及在姬姆萨氏和瑞氏染

色镜检的基础上，联合采用改良瑞氏染色和吖啶橙染色镜检能够提高温氏附红细胞体的

检出率。

以含 0.5%硬脂酸铝的 10#白油为油相，含咪唑苯脲的饱和蜂胶水溶液为水相，按照

油水相 2:1 进行乳化，研制咪唑苯脲缓释剂。在单因素试验的基础上，选取影响缓释剂

性质较显著的 3 个因素，即乳化温度、转速和乳化时间，每个因素三个水平，在不破乳

和储存稳定条件下，以缓释剂粘稠度为响应值，通过响应面试验设计确定缓释剂制备的

最佳工艺，并对制备的缓释剂从粒径大小与分布、通针性、稳定性、安全性和体外释药

特性等进行质量评价。结果表明：响应面优化所得的最佳乳化工艺条件为：乳化温度

60℃，转速 9508r/min，乳化时间 4min，此时缓释剂的粘稠度为 9.74s，粘稠度最小。在

最佳工艺条件制备的缓释剂粒径小、分布均匀、通针性好、毒性小、安全、稳定、没有

明显的突释现象，在 48h 内累积释药百分率为 98.7%，其常规的水剂 6h 已达到 99.5%，

能够起到缓释的作用。

选择 15 头温氏附红细胞体感染率 80%以上的奶牛，随机分成 3 组，每组 5 头，分

别为感染对照组、咪唑苯脲水剂组和缓释剂组，另设 1 个健康对照组。比较各试验组在

治疗前后红细胞感染率、生理生化指标和免疫指标变化。结果表明：咪唑苯脲缓释剂治

疗效果显著优于其常规剂型，且能够提高机体的免疫力。

关键词：温氏附红细胞体；生物学；咪唑苯脲缓释剂；响应面；治疗效果

目录

摘要................. I

Abstract.............II

缩略符号...........IV

前言.................1

附红细胞体研究现状.............2

1 病原学 ......... 2

2 流行病学 ..... 5

3 致病机理 ..... 5

4 临床症状 ..... 6

5 剖解变化 ..... 6

6 诊断方法 ..... 7

7 防治 ............. 7

蜂胶研究现状.....9

1 蜂胶的成份 . 9

2 蜂胶的作用 . 9

3 蜂胶的提取工艺 ........... 10

兽药缓释制剂研究现状....... 11

1 缓释制剂的特点 ........... 11

2 缓释制剂的应用 ........... 11

3 存在的问题 ................... 13

4 长效制剂的发展前景 ... 13

试验一 温氏附红细胞体生物学特性的研究...........14

1 材料与方法 ................... 14

1.1 材料..... 14

1.2 方法..... 16

2 结果与分析 ................... 17

2.1 运动学 17

2.2 染色特性................ 18

2.3 形态学电镜观察结果 ................ 21

3 讨论 ........... 23

3.1 温氏附红体的运动学特性 ........ 23

3.2 温氏附红体的染色特性 ............ 23

3.3 温氏附红体的电镜观察 ............ 24

4 小结 ........... 24

试验二 咪唑苯脲缓释剂的制备...........25

1 材料与方法 ................... 25

1.1 材料..... 25

1.2 方法.... 25

1.3 数据处理................ 29

2 结果与分析 ................... 29

2.1 蜂胶水溶性的制备 . 29

2.2 油相中硬脂酸铝含量与油水相比例关系的确定 ............ 29

2.3 咪唑苯脲缓释剂的制备结果 .... 30

2.4 粒径测定结果 ........ 33

2.5 稳定性试验结果 .... 34

2.6 通针性试验结果 .... 34

2.7 安全性检查结果 .... 34

2.8 体外释药测定结果 36

2.9 咪唑苯脲在缓释剂中的稳定性试验结果 ..... 39

3 讨论 ........... 39

3.1 缓释剂的制备 ........ 39

3.2 缓释剂的安全性 .... 41

3.3 体外释药特征 ........ 41

3.4 咪唑苯脲在缓释剂中的稳定性 41

4 小结 ........... 41

试验三 咪唑苯脲缓释剂治疗奶牛温氏附红体病的效果观察...42

1 材料与方法 ................... 42

1.1 材料..... 42

1.2 方法.... 43

1.3 数据处理................ 47

2 结果与分析 ................... 48

2.1 临床症状观察结果 48

2.2 血液涂片检查结果 50

2.3 血液生理指标测定结果 ............ 51

2.4 血液生化指标测定结果 ............ 53

2.5 血液免疫指标测定结果 ............ 56

2.6 药代动力学研究 .... 59

3 讨论 ........... 64

3.1 咪唑苯脲缓释剂对温氏附红体的治疗效果 64

3.2 咪唑苯脲缓释剂对患病奶牛血液生理生化指标的影响 64

3.3 咪唑苯脲缓释剂对患病奶牛免疫指标的影响 ................ 65

3.4 咪唑苯脲缓释剂药代动力学的探讨 ............ 67

4 小结 ........... 67

结论...................68

参考文献...........69

致谢...................74

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