[硕士论文] 金龟子围食膜结构组成及增效因子对其影响的研究 [复制链接]

资料简介：
硕士论文-金龟子围食膜结构组成及增效因子对其影响的研究，共62页，35961字

摘要

围食膜是大多数昆虫中肠细胞分泌的一层半透性膜状结构，成圆桶状把肠腔和中肠

壁细胞分开，它具有保护中肠上皮细胞、阻止有害物质侵入和帮助消化等多种功能。因

而将围食膜作为害虫生物防治的新靶标，破坏围食膜这一道物理屏障，即能促进病原物

对昆虫的侵染。因此研究昆虫围食膜的结构与组成以及破坏围食膜的分子机理，将会提

高微生物杀虫剂的杀虫效果，且对促进生物防治在农业生产中的应用具有指导意义。

本研究采用生化技术和分子生物学技术等手段，对华北大黑鳃金龟（Holotrichia

oblita）和暗黑鳃金龟（Holotrichia parallela）围食膜的结构组成及增效蛋白和荧光增白剂

FB28 对其围食膜的作用与影响进行分析。具体结果如下：

1. 华北大黑鳃金龟和暗黑鳃金龟的围食膜均为一层无色透明、厚薄均匀的长管状

薄膜，表面光滑致密，富有弹性，但与多数昆虫围食膜相比韧性较差。

2. 围食膜主要由蛋白质、糖和几丁质组成，采用 Bradford 法测得华北大黑鳃金龟

和暗黑鳃金龟围食膜蛋白质的含量分别为 36.25%和 38.17%，采用苯酚-硫酸法测得华北

大黑鳃金龟和暗黑鳃金龟围食膜糖的含量分别为 8.91%和 9.08%。

3. SDS-PAGE 分析华北大黑鳃金龟围食膜蛋白种类较多，有 28 条多肽比较清晰，

分子量多在 17.6kDa 到 320.3kDa 之间。暗黑鳃金龟围食膜蛋白种类也较多，有 15 条多

肽比较清晰，分子量多在 28.8kDa 到 170.0kDa 之间。

通过粉纹夜蛾肠粘蛋白（TnPM - IIM）特异多抗进行 Western blot，表明鳞翅目昆

虫围食膜中有与 TnPM - IIM 特异多抗起交叉反应的多种蛋白，而金龟子围食膜中未发

现与 TnPM - IIM 特异多抗起交叉反应的蛋白。

4. 棉铃虫颗粒体病毒增效蛋白处理鞘翅目金龟子和鳞翅目昆虫围食膜，鳞翅目昆

虫围食膜蛋白多肽均有不同程度的降解，金龟子围食膜蛋白多肽未有降解现象，说明棉

铃虫颗粒体病毒增效蛋白对金龟子围食膜没有作用，进一步分析表明鞘翅目金龟子和鳞

翅目昆虫围食膜蛋白组成等方面存在差异。

5. 荧光增白剂 FB28 离体处理华北大黑鳃金龟和暗黑鳃金龟围食膜，多数蛋白多肽

被解离，且随处理时间的增长，蛋白被解离的量增大。结果表明，围食膜蛋白主要是几

丁质结合蛋白，荧光增白剂 FB28 可使几丁质结合蛋白从围食膜上解离下来。

6. 荧光增白剂 FB28 喂食华北大黑鳃金龟和暗黑鳃金龟，实验表明荧光增白剂

FB28 对围食膜的破坏作用是短暂的、可逆的。喂以荧光增白剂后，围食膜破坏，幼虫

若取食新鲜食物可促使荧光增白剂从中肠中排出，造成了荧光增白剂作用的可逆性。

关键词：围食膜；华北大黑鳃金龟；暗黑鳃金龟；结构组成；增效蛋白；荧光增白

剂

目 录

中文摘要....1

英文摘要....3

前言....1

1. 昆虫中肠防御体系 - 中肠围食膜 ...........1

2. 生物防治增效因子.................10

3. 研究的目的意义...15

材料与方法................17

1. 试验材料...............17

2. 方法步骤...............20

2.1PM 的制备 .......20

2.2PM 的形态结构观察 .........20

2.3PM 组分含量测定 .............20

2.4PM 的蛋白组成分析 .........23

2.5增效蛋白对 PM 的作用 ....25

2.6 荧光增白剂 FB28 对 PM 的作用与影响 .............25

结果与分析................26

1. PM 的生理位置 ....26

2. PM 的结构组成 ....26

2.1PM 的形态与结构 .............26

2.2PM 组分含量 ...27

2.3PM 的蛋白组成 .................28

3. 增效蛋白对 PM 的影响 ........30

4. 荧光增白剂 FB28 对 PM 的作用与影响 .................33

4.1 荧光增白剂 FB28 对 PM 蛋白组分的影响 .........33

4.2 荧光增白剂 FB28 对 PM 结构的影响 .................33

讨论..35

结论..40

参考文献..41

附录..48

致谢..49

硕士期间发表的学术论文..........50

导师组意见................51

学位论文独创性声明及学位论文版权使用授权书......52

资料文件预览：
共1文件夹，1个文件，文件总大小：1.65MB，压缩后大小：773.50KB

• 硕士论文-金龟子围食膜结构组成及增效因子对其影响的研究
• 硕士论文-金龟子围食膜结构组成及增效因子对其影响的研究.doc  [1.65MB]