[硕士论文] 绵羊BMPR-ⅠB基因多态性与产羔数的相关分析 [复制链接]

资料简介：
硕士论文-绵羊BMPR-ⅠB基因多态性与产羔数的相关分析，共58页，29112字

摘要

如何提高绵羊的繁殖力是当前肉用绵羊育种工作的一个重点。从分子生物学的角度

来探明控制绵羊高繁殖力性状的主效基因是育种工作的一个重要手段。本研究分析了骨

骼发生蛋白 IB 受体基因的多态性，并探索该候选基因与小尾寒羊、萨福克羊及萨寒杂

交羊三个绵羊种群繁殖力之间的关系，为我国开展多胎优质肉用绵羊的育种提供科学依

据。

BMPR-ⅠB 又名骨骼形态发生蛋白 IB 受体，它位于绵羊的第 6 号染色体上，人们发

现绵羊 BMPR-ⅠB 基因上有两个位点的突变，一个突变位点是 746 位，这个位点由 A 突

变为 G，这个突变的结果使得绵羊 BMPR-ⅠB 所表达的氨基酸序列相应的由谷氨酰氨变成

了精氨酸；另一个位点是 1113 位，它的突变是由 C 变为 A，但这个位点突变没有引起相

应的氨基酸序列变化。

测序结果表明小尾寒羊 BMPR-ⅠB 基因突变的具体位点在 746 号位点,突变后碱基由

A 变为 G。

应用 PCR－RFLP 技术对三组样本进行 BMPR-ⅠB 基因多态性分析。其中小尾寒羊 108

只，萨福克羊 35 只，萨福克与小尾寒羊的杂交一代羊 81 只。得到如下结果：多产品种

小尾寒羊 BMPR-ⅠB 基因存在着单核苷酸多态性（BB、B+、++），低产的萨福克羊没有发

现相应的单核苷酸多态性（++），萨寒杂交羊存在多态性（B+、++）。卡方检验表明，三

个绵羊种群之间 BMPR-ⅠB 基因型分布差异极显著（P<0.01）。

对三个绵羊种群之间 BMPR-ⅠB 基因型分布差异与产羔数的相关分析表明，三个绵

羊种群之间 BMPR-ⅠB 基因型分布的差异导致三个绵羊种群间产羔性能的不同。对不同

种群绵羊产羔数最小二乘分析结果表明，小尾寒羊平均产羔数比萨福克羊多产 1.11 只

（P<0.01），萨含杂交羊平均产羔数比萨福克羊多产 0.62 只（P<0.01）。

关键词：小尾寒羊；萨福克羊；萨含杂交羊；BMPR-ⅠB；多胎性；产羔数

目录

中文摘要‥……ⅰ

英文摘要………ⅲ

缩略符号………ⅴ

文献综述………1

1 绵羊多胎基因的研究进展……1

FecB 基因的研究进展………1

BMPs 和 BMPR 的研究进展…… ………………5

BMPR-ⅠB 基因的研究进展…7

其他多胎基因………………8

国内相关研究进展……… 11

RFLP 遗传标记简介…………12

选用的绵羊品种简介………13

4 本研究的目的意义 …………13

研究内容

1材料和方法15

1.1试验材料15

1.1.1 实验动物及采样方法……15

1.1.2 主要仪器设备……………15

1.1.3 主要药品和酶……………15

1.1.4 有关试剂和溶液的配制…16

1.2试验方法…………18

1.2.1耳组织 DNA 的提取……18

1.2.2DNA 浓度和纯度的检测…19

1.2.3PCR-RFLP 检测程序……19

1.3BMPR-ⅠB 基因 Q249R 突变区的纯合子个体的克隆测序……… …………21

1.3.1PCR 产物的回收…………21

1.3.2回收的 PCR 产物与载体的连接…………22

1.3.3感受态细胞的制备—氯化钙法…………22

1.3.4转化…23

1.3.5质粒 DNA 的小规模提取—碱裂解法……24

1.3.6重组质粒的酶切鉴定…24

1.4统计分析方法……………25

1.4.1品种基因频率和基因型频率的计算……25

1.4.2绵羊骨骼形态发生蛋白受体基因位点 Hardy-Weinberg 平衡状态的检验25

2结果与分析28

2.1绵羊基因组 DNA 提取结果28

2.2BMPR-ⅠB 基因 Q249R 突变区的 PCR 扩增结果28

2.3AvaⅡ酶切产物电泳结果与分析…………28

2.4测序结果29

2.5不同绵羊品种 BMPR-ⅠB 基因型频率和基因频率分析……30

2.6不同绵羊品种 BMPR-ⅠB 基因型分布差异检验……………30

2.7BMPR-ⅠB 基因型分布与产羔数的统计分析……… …………31

3讨论………33

3.1实验材料的选择…………33

3.2BMPR-ⅠB 基因 Q249R 突变的检测…………33

3.3BMPR-ⅠB 基因 Q249R 突变对绵羊产羔数的影响……………35

4结论………36

参考文献………………37

致谢42

攻读硕士论文期间发表的学术论文………43

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