[硕士论文] 寿光鸡胚胎原始生殖细胞迁移与分布观察 [复制链接]

资料简介：
硕士论文-寿光鸡胚胎原始生殖细胞迁移与分布观察，共48页，28183字

摘 要

本研究旨在观察和分析寿光鸡早期胚胎各发育时期原始生殖细胞（PGCs）的形态、

迁移和分布情况，为寿光鸡遗传资源的保存、生殖腺嵌合体以及转基因鸡的构建奠定理

论和实践基础。本研究用常规石蜡切片，经PAS单一染色、PAS-苏木精复染或苏木精-

伊红（HE）复染，对孵化1至8天的各期鸡胚PGCs的形态、迁移和分布进行了系统的观

察。结果如下：

1.PGCs形态学特点

生殖新月区 PGCs 呈不规整的圆形或椭圆形，细胞核为圆形或卵圆形，偏于细胞一

侧。细胞质内含大量的糖原。细胞直径为 10～22.5μm，长轴为 15～22.5μm，短轴为 10～

15μm，直径平均为 11.8±2.69×16.5±1.97μm。细胞核直径平均为 7.5±0.6μm。

血液 PGCs 呈圆形，细胞核呈圆形，偏于细胞一侧。糖原颗粒相比生殖新月期减少。

细胞直径为 10～12.5μm，平均为 11.5±1.2μm，细胞核直径平均为 7.5±0.6μm。

性腺 PGCs 呈圆形或卵圆形，有伪足，其胞核呈圆形或椭圆形，偏向细胞的边缘。

胞质着色很淡，糖原颗粒更加减少。细胞直径为 10～15μm，平均直径为 12.75±1.46μm，

细胞核直径平均为 7.5±0.6μm。

2.PGCs分布特点

孵化 19～22 h（5 期）胚胎，PGCs 主要聚集于生殖新月区；孵化 29～33h（9 期）

胚胎，PGCs 分布在胚盘明区血管中；孵化 40～45h (11 期)首次在胚体的卵黄静脉入口

处和头部观察到 PGCs，PGCs 开始进入胚体；孵化 48～55 h（13～15 期）胚胎，PGCs

聚集于胚体的心脏、大血管及头部间充质血管；孵化 72 h(18 期)胚胎，PGCs 大量迁移

至生殖嵴处。孵化 3.5～5d 胚胎，生殖嵴 PGCs 的数量逐渐增多，糖原颗粒逐步减少；

孵化第 6d 胚胎，性腺初具卵巢特征；孵化的第 7d，卵巢或睾丸的分化进一步明显，PGCs

胞质内糖原颗粒基本消失。

这些结果表明，PGCs 在孵化 33h 时已开始从生殖新月区进入卵黄囊血管的迁移；

在孵化 40h 已开始进入胚体；孵化 72h 时已开始迁入生殖嵴，3.5～5d 内是 PGCs 迁移

的最高时期。因此，采集 PGCs 的最佳时期为：孵化 19～22h 生殖新月区，孵化 48～55

h 的血管中和孵化 4～5d 的生殖嵴中。

关键词：寿光鸡；原始生殖细胞；形态；迁移；分布

目 录

中文摘要……1

英文摘要……2

前言…………1

文献综述 … … … …… … … … … … … 2

1.禽类胚胎学基础…………………2

1.1 禽类卵子的结构组成…………2

1.2 禽卵的受精……………………2

1.3 禽类胚胎早期发育……………2

2.禽类原始生殖细胞研究进展……3

2.1 PGCs的特性……………………3

2.2 PGCs的形态……………………4

2.3 PGCs的体外观察和鉴定………5

2.4 PGCs起源5

2.5 PGCs的迁移……………………6

2.5.1 PGCs的分离期……………….6

2.5.2 PGCs的迁移期 ………………6

2.5.3 PGCs的安置期 ………………7

2.6 PGCs的数目……………………9

2.7 PGCs迁移机制 …………………9

2.7.1 主动迁移作用 ………………9

2.7.2 被动迁移作用………………10

2.7.3 生殖嵴的趋化作用…………10

2.7.4 细胞外基质和细胞因子的作用……………………11

试验材料与方 法 ……… 1 2

1.试验材料…12

2.试验设备 12

3.试验方法…12

3.1 鸡蛋的孵化…………………….12

3.2 胚盘的采集……………………12

3.3 胚胎的采集……………………12

3.4 PAS-苏木精整体装片染色……12

3.5 石蜡切片制作…………………13

3.6 石蜡切片 PAS-苏木精染色… 13

3.7 石蜡切片 HE 染色……………14

试验部分 ………… ……… 1 5

1.试验结果…15

1.1 整体压片染色结果……………15

1.2 连续切片染色结果……………15

1.3 各期 PGCs 的形态观察………15

1.4 各期中 PGCs 的迁移、聚集及分布如下描述………15

2 讨论………18

2.1 PGCs 的特性和形态……………18

2.2 PGCs 的迁移和聚集……………19

2.2.1 PGCs 的迁移…………………19

2.2.2 PGCs 的分裂增殖……………20

2.3 PGCs 的定居……………………20

2.3.1 PGCs 到达性腺的时间………20

2.3.2 性腺分化时组织结构的变化21

结论…………22

参考文献…. 23

附录……… 27

图版说明….34

致谢…………37

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