[硕士论文] 山东省番茄根结线虫种类鉴定和抗性种质资源筛选 [复制链接]

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硕士论文-山东省番茄根结线虫种类鉴定和抗性种质资源筛选，共77页，38177字

摘 要

根结线虫（Meloidogyne spp.）是一类在番茄上为害极大的植物病原线虫，它广泛分布

于世界各地。目前国内外己描述和鉴定的根结线虫有 80 多种。为了明确山东省为害番茄的

根结线虫的种类及其分布，本文对采集的 7 个为害番茄的根结线虫种群进行了种类鉴定。

为尽快选育出抗性品种，本文同时探求可靠的番茄抗性接种鉴定方法，对 24 份高代材料、

93 个组合的抗性进行了评价。

1.根结线虫的主要种类、分布

对采集的 7 个为害番茄的根结线虫种群进行单卵纯化和扩大培养后，经过形态学观

察 和 测 量 ， 同 工 酶 电 泳 共 鉴 定 出 南 方 根 结 线 虫 （ M.incognita ）、 花 生 根 结 线 虫

（M.arenaria）、北方根结线虫（M.hapla）3 个种。

在所鉴定的种群中，4 个种群为南方根结线虫，1 个种群为花生根结线虫，南方根

结线虫和花生根结线虫的混合种群 1 个，南方根结线虫和北方根结线虫的混合种群 1 个。

按其地理分布广度，对番茄的为害程度，可得出南方根结线虫是山东省最重要的为害番

茄的根结线虫。

2.抗性鉴定方法筛选

以感病品种金冠（Jinguan）和南方根结线虫（M.incognita）为材料研究了接种鉴定

技术，研究结果表明接种苗龄、接种量对根结数有极显著的影响，是影响番茄病情（根

结数）的关键性因子，而接种深度、接种天数对根结数无显著影响。

接种苗龄 20d(天)，接种深度 6cm，接种量 3000 条· 株-1，接种天数 54d 为最佳抗

性鉴定技术。

3.抗性材料筛选

采用筛选出的最佳接种鉴定技术，对 24 份高代材料的抗病性进行鉴定，结果如下：

高抗材料 1 份、抗病材料 3 份、中抗材料 7 份、感病材料 11 份、高感材料 2 份。

4.抗性组合筛选

2005 年温室冬春茬 44 个杂交组合抗性鉴定结果：免疫组合 1 个、高抗组合 18 个、

抗病组合 7 个、中抗组合 14 个、感病组合 6 个、高感组合 1 个；对照品种金冠为感病。

2005 年温室秋冬茬 49 个杂交组合抗性鉴定结果：免疫组合 12 个、高抗组合 13 个、

抗病组合 8 个、中抗组合 14 个、感病组合 2 个；对照品种卓越、多菲亚为高抗。

关键词：番茄 根结线虫 种类鉴定 抗性评价

目 录

中文摘要……………Ⅰ

英文摘要……………Ⅲ

前言…………………1

1 番茄根结线虫的为害、防治…………………2

1.1 根结线虫对番茄的为害…………………2

1.2 番茄根结线虫的防治方法………………2

1.2.1 植物检疫2

1.2.2 农业防治2

1.2.3 物理防治3

1.2.4 化学防治3

1.2.5 生物防治3

1.2.6 抗性品种5

2 根结线虫病病原鉴定研究进展………………6

2.1 分类、鉴定研究现状……………………8

2.1.1 形态学特征分类鉴定………………8

2.1.2 鉴别寄主反应鉴定…………………11

2.1.3 分子生物学技术在分类鉴定中的应用…………………………11

2.2 讨论与展望…14

3 番茄根结线虫病抗病育种研究进展…………14

3.1 抗性鉴定技术14

3.2 抗病资源收集和利用……………………19

3.3 育种研究进展19

3.4 抗性基因及其利用………………………20

3.5 番茄根结线虫病育种展望………………20

材料与方法…………21

1 材料………………21

1.1 根结线虫种群21

1.2 番茄材料……21

2 方法………………21

2.1 根结线虫种群的采集、纯化和繁殖……22

2.1.1 根结线虫种群的采集………………22

2.1.2 根结线虫种群的分离和纯化………22

2.2 种群的形态学鉴定………………………22

2.2.1 线虫的分离、杀死和固定…………22

2.2.2 会阴花纹制备………………………22

2.2.3 虫体观察测量………………………22

2.3 种群的同工酶电泳鉴定…………………22

2.3.1 取样……23

2.3.2 酶提取液23

2.3.3 酶的提取23

2.3.4 电泳……23

2.3.5 染色液的配制………………………23

2.3.6 酶的染色23

2.3.7 结果判定24

2.4 抗性鉴定技术筛选………………………24

2.5 抗性自交系筛选…………………………25

2.6 抗性组合筛选26

结果与分析…………27

1 形态鉴定结果分析27

1.1 测量数据……27

1.2 形态描述……30

1.2.1 花生根结线虫………………………30

1.2.2 北方根结线虫………………………30

1.2.3 南方根结线虫………………………30

2 种群酶谱鉴定结果分析………………………33

3 抗性鉴定方法筛选结果………………………38

4 抗性自交系筛选结果…………………………41

5 抗性组合筛选结果43

5.1 2005 年温室冬春茬番茄组合抗性鉴定结果…………………………43

5.1 2005 年温室秋冬茬番茄组合抗性鉴定结果…………………………43

讨论…………………48

1 根结线虫的主要种类…………………………48

2 根结线虫的分类依据…………………………48

2.1 会阴花纹的分类价值……………………49

2.2 同工酶电泳在分类鉴定中的应用………49

3 抗性鉴定技术筛选49

4 抗性材料盆栽筛选51

5 抗性材料温室筛选51

结论…………………53

1 根结线虫的主要种类、分布…………………53

2 抗性鉴定方法筛选53

3 抗性自交系筛选…53

4 抗性组合筛选……53

参考文献……………54

附录 A ：电泳溶液

附录 B ：电泳注意事项

附录 C ：线虫酶液提取

附录 D ：缩略语

致谢

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