[硕士论文] 山羊卵母细胞体外成熟和体外受精中细胞核迁移的研究 [复制链接]

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硕士论文-山羊卵母细胞体外成熟和体外受精中细胞核迁移的研究，共59页，24596字

摘要

细胞核在生物细胞中占主导的地位，绝大部分遗传物质存在于核中，因而对卵母细

胞体外成熟培养和体外受精过程中细胞核迁移的研究是十分必要的。它对于其他胚胎工

程技术有极大的促进作用。特别是对于核移植中卵母细胞去核方法的研究有极其重要的

意义。

本试验采用传统的醋酸地衣红染色法，对卵母细胞体外成熟和体外受精过程中细胞

核的迁移进行了详细地观察。为进一步研究卵母细胞体外成熟和体外受精过程中的各种

现象及分子机理提供了基础数据。

结果表明：

1、血清、抗生素和卵巢直径对卵母细胞的体外成熟影响不大（差异不显著）；切割

法得到的可用卵数显著高于抽吸法，差异极显著。

2、山羊卵母细胞的成熟分裂从 GVBD 现象起，其细胞核即由卵母细胞的近中央位置

逐渐移向细胞表面，之后同源染色体分开，排出第一极体。卵母细胞成熟后，随

着时间的延长，细胞核又逐渐远离第一极体端。

3、培养开始时绝大部分卵母细胞处于 GV 期，之后 DK 期、M I 期、A I 期、M II 期

相继出现并达到峰值。

4、应用面积积分法计算得知：体外成熟培养时，0～5.7 小时山羊卵母细胞处于 GV

期，持续时间为 5.7 小时；5.7～8.9 小时为 DK 期，持续时间为 3.2 小时；8.9～

15.9 小时卵母细胞处于 M I 期，持续 7 小时；15.9～17.5 小时为 A I 期，持续

1.6 小时；17.5～22 小时为 M II 期，持续 4.5 小时。

5、雌雄原核形成后逐渐相互靠近，形成合子。

关键词：orcein(地衣红)

卵母细胞核迁移

体外成熟

面积积分法

体外受精

目录

摘要I

英文摘要……………………II

缩略词表……………………III

前言及综述…………………1

前言1

综述：山羊卵母细胞体外成熟和体外受精过程中细胞核迁移的研究进展…3

1、卵母细胞核迁移（germinal vesicle migration,GVM）的研究概况.………3

2、研究细胞核迁移的有效途径……………………..5

3、GVM 和原核迁移的细胞机理与分子生物学特点6

4、存在问题及解决方法…..9

5、应用前景………………..9

试验内容……………………11

1 影响山羊卵母细胞体外成熟的因素………………11

1.1 材料和方法……………………….……………….14

1.2 试验结果………………..14

1.3 讨论…….……………….17

2 山羊卵母细胞体外成熟过程中细胞核迁移的研究………………….……...18

2.1 材料和方法……………………….……………….18

2.2 试验结果.……………….21

2.3 讨论…….……………….25

3 山羊卵母细胞的体外受精及受精过程中原核迁移的研究…………………26

3.1 材料和方法……………………….……………….26

3.2 试验结果.……………….29

3.3 讨论…….……………….32

结论33

参考文献……………………34

附录41

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