[硕士论文] 野菊花中农用抑菌和除草活性物质的研究 [复制链接]

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硕士论文-野菊花中农用抑菌和除草活性物质的研究，共73页，33798字

摘 要

野菊花为菊科植物野菊（Chrysanthemum indicum L）的干燥头状花序，是一种十分

丰富的植物资源。野菊花在医药、食品、保健品、化妆品等多方面都有着良好的开发前

景。本文以野菊花为试验材料，研究其农用抑菌和除草活性，在生物活性追踪指导下，

对活性成分进行了提取、分离、纯化，并通过质谱、氢谱（1H-NMR）和碳谱（13C-NMR）

初步确定了活性化合物的结构。试验结果为进一步以野菊花为原料研发植物源农药或从

中筛选活性先导化合物进行结构修饰、仿生合成提供了试验依据。

1 采用菌丝生长速率法测定了野菊花提取物对供试植物病原菌的抑制作用，结果表

明野菊花乙醇提取物对供试病原菌和植物种子均有较好的抑制效果。对苹果腐烂病菌的

效果最好，EC50 为 0.468 mg/mL；对反枝苋胚根生长的 EC50 为 1.25 mg/mL；对反枝苋

胚轴生长的 EC50 为 115 mg/mL。

2 乙醇提取物经水悬浮后分别用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇进行萃取，对各萃取相

进行活性测定。结果表明活性物质主要集中在乙酸乙酯相。乙酸乙酯萃取物对苹果腐烂

病菌的抑制效果最好， EC50 为 0.256 mg/mL；对反枝苋胚根抑制作用的 EC50 为

0.31mg/mL；对反枝苋胚轴抑制作用的 EC50 为 5.44 mg/mL。

3 对乙酸乙酯萃取层进行硅胶柱层析，得到 28 个馏分，进行活性测定。结果表明

27 号馏分对供试病原菌的活性最好，在浓度为 1mg/mL 时，对苹果腐烂病菌的抑制率为

83.4%。对 27 号馏分再作进一步的分离，得到化合物 A。

4 化合物 A 经质谱、氢谱（1H-NMR）和碳谱（13C-NMR）鉴定，初步确定为刺槐

素 7-芸香糖苷。化合物 A 对苹果腐烂病菌的 EC50 为 0.0690mg/mL，对反枝苋胚根抑制

作用的 EC50 为 8.52 mg/mL，对胚轴抑制作用的 EC50 为 14.2 mg/mL。这是关于刺槐素

7-芸香糖苷的抑菌活性和除草活性的首次报道。

关键词：野菊花；抑菌活性；除草活性；刺槐素 7-芸香糖苷

目 录

摘 要 ....... 1

Abstract .... 2

前 言 ....... 3

文 献 综 述 . 5

1 植物源杀菌剂的研究概况....... 5

1.1 国外文献具有抑菌活性的植物资源 ............. 5

1.2 国内报道具有抑菌活性的植物资源 .............. 9

1.3 植物中抑菌活性成分类型 ... 11

1.4 商品化的植物源杀菌剂 ..... 12

2 植物源除草剂的研究概况 ..... 12

2.1 具有除草活性的植物资源.... 12

2.2 植物中除草活性成分类型.... 16

2.3 商品化的植物源除草剂 ..... 17

3 野菊花的研究进展 ........... 17

3.1 野菊花化学成分的研究...... 18

3.2 野菊花生物活性的研究...... 19

3.2.1 野菊花在医药上的研究概况 19

3.2.2 野菊花的农用研究概况 ... 21

材 料 与 方 法............... 22

1 材料 ..... 22

1.1 供试植物样品............. 22

1.2 供试植物病原真菌 ......... 22

1.3 供试植物种子............. 22

1.4 仪器与试剂............... 23

1.4.1 仪器 .. 23

1.4.2 供试试剂............... 23

2 生物活性测定方法 ........... 23

2.1 抑制真菌活性测定方法...... 23

2.2 除草活性的测定方法 ....... 24

3 野菊花中活性物质的提取、分离及鉴定........... 24

3.1 野菊花的乙醇提取 ......... 24

3.2 乙醇提取物的萃取 ......... 24

3.3 乙酸乙酯萃取物柱层析分离.. 25

4 化合物结构鉴定方法 ......... 25

结果与分析 . 27

1 野菊花乙醇提取物的抑菌活性.. 27

1.1 野菊花乙醇提取物对几种植物病原菌的抑制作用.. 27

1.2 野菊花乙醇提取物对 6 种植物病原菌的 EC50 .... 28

1.3 野菊花乙醇提取物对三种植物种子的抑制作用 ... 28

1.4 野菊花乙醇提取物对三种种子的 EC50........... 29

2 萃取物的抑菌作用 ........... 29

2.1 四种萃取物对植物病原菌的抑制作用 ........... 29

2.2 石油醚萃取物和乙酸乙酯萃取物对三种植物病原菌的 EC50 的比较 .... 30

2.3 萃取物对三种植物种子的抑制作用 ............. 31

2.4 石油醚萃取物对三种植物种子胚根和胚轴生长的抑制作用 ........... 32

2.5 乙酸乙酯萃取物对三种植物种子胚根和胚轴生长的抑制作用 ......... 32

3 乙酸乙酯萃取物的柱层析结果与分析 ............ 33

4 化合物 A 的活性测定 ......... 34

4.1 化合物 A 的抑菌活性测定.... 34

4.2 化合物 A 的除草活性测定 ... 35

5 结构鉴定 . 35

结论 ....... 38

讨论 ....... 39

参考文献 ... 41

附录 ....... 48

致谢 ....... 57

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