[毕业论文] 犬穿透性角膜移植术免疫排斥反应控制试验 [复制链接]

资料简介：

毕业论文-犬穿透性角膜移植术免疫排斥反应控制试验，共26页，13838字，附任务书、开题报告、文献综述
主要内容：1.犬穿透性角膜移植术后用不同免疫抑制剂防治免疫排斥反应的效果。
2.裂隙灯下观察不同免疫抑制剂对穿透性角膜移植术后角膜增厚、新生血管、角膜混浊方面的影响。
3.组织切片观察不同免疫抑制剂对犬穿透性角膜移植术后新生血管、炎性细胞浸润等方面影响。
技术指标：1.收集相关文献资料，并写出综述报告。
2.根据研究内容写出课题研究方案(开题报告)。
3.通过对角膜移植术后角膜的裂隙灯观察和组织切片观察，得出结果，
并对结果作出判定。

研究内容：
2.1角膜植片制作
2.2角膜植床制作
2.3裂隙灯观察并计算免疫排斥时间
2.4取样及角膜标本制作
2.5病理组织学观察
2.5.1 角膜增厚程度
2.5.2新生血管情况
2.5.3 淋巴细胞浸润程度

研究方法
3.2.1试验准备
3.2.1.1 试验器械
外科显微镜、裂隙灯、呼吸麻醉机、麻醉咽喉镜、高压灭菌的常规器械和眼科专用器械各一套，以及眼科缝线、开睑器、5号钝弯冲洗针、无菌棉签等。
3.2.1.2试验药品
0.1%雷帕霉素、0.1%地塞米松、庆大霉素、甘露醇注射液、1%盐酸丁卡因、2%盐酸
利多卡因、地塞米松注射液、速眠新Ⅱ注射液、1%硝酸毛果芸香碱、医用透明质酸钠、盐酸肾上腺素、异氟烷、生理盐水，平衡盐液（500mL蒸馏水中加氯化钠3.2g，氯化钾0.375g，CaCl2.2H2O 0.315g，MgCl2.6H2O 0.15g，无水醋酸钠1.95g，枸橼酸钠0.85g，PH为7.0~7.5，于0.45μm微孔滤膜精滤，115℃热压灭菌30 min，4℃保存）等。
3.2.1.3试验动物及分组
选择本地杂交犬45只，雌雄不拘，健康无病，3—5公斤。随机取15只作为供体犬，
剩下的30只随机分为3组，每组10只，分别为：生理盐水组（对照组）、地塞米松组和
雷帕霉素组。
3.2.2建立穿透性角膜移植模型
3.2.2.1 角膜植片制作
将供体犬安乐死后，手术方法取新鲜眼球，用7.75mm环钻钻取植片。湿房保存，待用。
3.2.2.2 犬麻醉
基础麻醉（速眠新Ⅱ注射液）后使用咽喉镜插管，对犬进行呼吸麻醉。
3.2.2.3 角膜植床制作
用7.5mm环钻在麻醉犬的左眼钻透但只钻穿一个小口，同时用黏弹剂维持前房，再用眼科剪从钻穿的小口顺着环钻的钻痕剪下角膜。
3.2.2.4 缝合
放置角膜植片，采用10-0尼龙线间断缝合16针。首先缝合12点方位，然后再缝6、3、9点方位，最后在四个象限里均匀缝合剩下的针数。
3.2.2.5 前房建立
缝合完成后用注射器在前房内注入生理盐水建立前房。
3.2.3 术后护理
给术后犬戴上伊丽莎白圈，防止自我伤害。术后每天肌肉注射氨苄青霉素50万单位1支，连续3天，预防继发感染。术后第1天开始滴眼，3组分别给不同的滴眼液，每天3次，每次两滴，连续60天。
3.2.4 指标观察
3.2.4.1裂隙灯观察
从术后第一天开始，每天在裂隙灯下进行观察，综合角膜增厚情况、新生血管以及角膜混浊程度来判断其发生免疫排斥的时间，并记录开始发生排斥的时间点。
3.2.4.2 病理组织学观察
角膜标本制作：在术后30天取样，每组取两只犬。麻醉后静脉注射饱和氯化钾，
实行安乐死后立即手术摘除术眼，剪下完整角膜（带角膜缘），置于4%甲醛溶液固定，常规石蜡包埋，切片备用。切片苏木素-伊红（HE）染色，光学显微镜下观察犬角膜各层结构、形态学变化、炎症细胞浸润及血管增生等。

摘要:为了探讨术后用药对犬穿透性角膜移植术免疫排斥反应的影响，本试验采用异氟烷吸入麻醉的方法对试验犬进行穿透性角膜移植术，建立动物模型，术后分别连续用生理盐水（对照组）、地塞米松和雷帕霉素滴眼液进行滴眼，通过裂隙灯及组织切片观察角膜免疫排斥情况.试验结果为生理盐水组发生免疫排斥反应的平均时间为8.25±1.04d，地塞米松组为24.00±10.21d，雷帕霉素组为53.50±6.97d。至观察期结束，雷帕霉素组仍有3例角膜中央保持透明。各组间两两比较，均有统计学差异：地塞米松组、雷帕霉素组与生理盐水组比较，发生免疫排斥反应的时间明显延迟（P<0.01）；雷帕霉素组与地塞米松组比较，发生免疫排斥反应的时间明显延迟（P<0.01）。术后30d组织病理学检查：生理盐水组整个角膜植片水肿增厚，角膜上皮溶解，基质层增厚，胶原纤维排列紊乱，伴有新生血管形成和大量炎性细胞浸润，后弹力层仍存在，内皮细胞脱落；地塞米松组角膜植片中央基质细胞增多，内皮脱落，植片与植床创缘基质层出现空泡，并有炎性细胞浸润及新生血管结构；雷帕霉素组结构基本正常，仅见角膜上皮变薄。试验证明雷帕霉素滴眼液应用于犬穿透性角膜移植可显著抑制炎性细胞浸润及新生血管生成，维持角膜组织结构正常，延缓犬角膜移植术后免疫排斥反应的发生，提高了角膜移植的成功率。
关键词：犬；穿透性角膜移植；免疫排斥

目 录
西南大学本科毕业论文（设计）任务书 2
文献综述 4
西南大学本科毕业论文（设计）开题报告 9
正文 13
摘要 13
前言 14
材料与方法 14
试验结果 18
分析与讨论 22
结论 24
参考文献： 24
致谢： 24
本科毕业论文（设计）指导教师评阅表 26
本科毕业论文（设计）交叉评阅表 27
本科毕业论文（设计）答辩记录 28

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