[硕士论文] 多价大肠杆菌噬菌体裂解性能分析及基因组注释 [复制链接]

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硕士论文-多价大肠杆菌噬菌体裂解性能分析及基因组注释，共70页，36385字

摘 要

多价噬菌体具有广泛的宿主谱，在细菌病的治疗方面有着广阔的应用前景。本研究

以一株禽源致病性大肠杆菌的多价噬菌体 Bp7 为主要研究对象，进行了噬菌体形态、裂

解谱、生活周期、基因组学及其与其它噬菌体的抗原差异性分析的一系列研究。

以 40 株大肠杆菌为宿主菌，采用双层琼脂平板法测定噬菌体 Bp7 的效价及裂解谱，

并应用透射电镜观察分析其病毒粒子形态以及其侵染并裂解大肠杆菌的过程。结果显

示 ：Bp7 宽噬率为 35%。病毒粒子的头部外廓呈六边形，平均直径约 73nm，尾长约 106nm，

有尾鞘；噬菌体 Bp7 侵染大肠杆菌后 30min 时处于隐蔽期，45min 时处于成熟阶段，60min

时已经进入释放期，一个溶菌周期大约为 60min。

选择 6 株不同裂解谱的大肠杆菌噬菌体，进行抗体与噬菌体的交叉抑制试验，并经

SDS-PAGE 电泳分析噬菌体间的抗原差异。结果：原裂解谱相同的噬菌体，主蛋白区域

分布相同；原裂解谱部分相同的噬菌体，蛋白条带分布情况相似。具有相同或部分相同

裂解谱的噬菌体，在吸附同一株大肠杆菌时所结合的位点并不一定相同；在这 6 株噬菌

体的表面存在着部分相同的表面抗原，同时存在着各自特异的表面抗原。

采用鸟枪法对噬菌体 Bp7 基因组进行序列测定，并进行注释。结果：噬菌体 Bp7

与肠杆菌科噬菌体 JS98 和 JS10 同源性达 90%以上；已发现 243 个 ORFs，预测到 68 个

可能基因，包括头部、颈部、衣领、尾鞘、尾管、基底板、尾丝基因、 DNA 聚合 酶、

翻译抑制蛋白、DNA 结合蛋白、重组蛋白、引发酶/解旋酶、末端酶和假设蛋白等基因。

关键词：多价噬菌体；大肠杆菌；裂解谱；序列测定

目录

中文摘要.....I

英文摘要....II

英文缩略词表.....III

第一章 文献综述....1

第二章 试验研究...14

前 言.14

试验一 大肠杆菌噬菌体 Bp7 裂解谱的测定及其裂解周期的电镜观察.15

1 材料和方法15

2 结果与分析18

3 讨论22

试验二 六株噬菌体及其多克隆抗体的交叉抑制试验...24

1 材料与方法24

2 结果与分析29

3 讨论33

试验三 大肠杆菌多价噬菌体 BP7 全基因组序列测定.. 35

1 材料和方法35

2 结果与分析38

3 讨论46

结论..49

创新点50

参考文献....51

附录..55

致谢..60

攻读硕士期间发表的论文..61

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