肺泡巨噬细胞Toll样受体2_4_省略_通路在呼吸机相关性肺损伤中的... [复制链接]

资料简介：
肺泡巨噬细胞Toll样受体2_4_省略_通路在呼吸机相关性肺损伤中的作用（硕士学位论文），共75页。
目的  探讨肺泡巨噬细胞(alveolar  macrophages,  AMs)  Toll 样受体2,4,9(TLR9)-髓样分化因子 88(MyD88)信号通路在呼吸机相关性肺损伤(VILI)中的作用。
方法  清洁级 SD 大鼠 30 只，按随机数字表法将大鼠分为 3 组，每组10 只。A 组保留自主呼作为对照；B 组给予正常潮气量（VT 8 ml/kg）机械通气 4 h；C 组给予大潮气量(VT 40 ml/kg)机械通气 4 h。机械通气结束时，取部分肺叶组织进行 HE 染色，光镜(×400)下观察肺组织病理学结果；电镜下观察大鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞(AECⅡ)超微结构改变；测定肺组织湿/干质量(W/D)比值及支气管肺泡灌洗液(BALF)中总蛋白、白细胞介素(IL-6、IL-1β)的浓度；蛋白质免疫印迹试验(Western Blot)测定肺泡巨噬细胞 TLR2、TLR4、TLR9、MyD88、核转录因子—κΒ(NF-κΒ)的蛋白表达；实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测肺泡巨噬细胞 TLR2、TLR4、TLR9、MyD88、NF-κΒ 的 mRNA 表达。
结果  A、B 组大鼠肺组织病理结构基本正常，C 组大鼠肺组织有不同程度的损伤性改变；A、B 组大鼠 AECⅡ细胞超微结构基本正常；C 组 AECⅡ细胞核中的染色质、胞质内的板层小体、细胞膜以及微绒毛等均有不同程度的损伤性改变。与 A 组、B 组比较，C 组肺组织 W/D 比值(5.54±0.17比 4.58±0.17、4.69±0.16)，BALF 中总蛋白、IL-6、IL-1β 的浓度(总蛋白：6.33±0.61 比 0.45±0.05、0.47±0.04；IL-6：1989.38±103.12 比 1032.61±61.15、1009.89±69.04；IL-1β：2.79±0.25 比 1.05±0.15、1.23±0.22)，肺泡巨噬细胞TLR2、TLR4、TLR9、MyD88、NF-κΒ 的蛋白表达(TLR2：0.59±0.050 比0.35±0.036、0.36±0.031；TLR4：0.84±0.040 比 0.40±0.026、0.40±0.020；TLR9：0.77±0.042 比 0.30±0.027、0.31±0.037；MyD88：0.95±0.091 比 0.56±0.082、0.58±0.084；NF-κΒ：1.02±0.076 比 0.74±0.052、0.70±0.076)均明显升高，差
异有统计学意义(P＜0.05 或 P＜0.01)。B 组肺泡巨噬细胞 TLR2、TLR4、TLR9、MyD88、NF-κΒ  的 mRNA 表达分别是 A 组的 1.08±0.21、1.05±0.20、1.06±0.18、1.03±0.18、1.04±0.26 倍，差异均无统计学意义(均 P＞0.05)；C组肺泡巨噬细胞 TLR2、TLR4、TLR9、MyD88、NF-κΒ  的 mRNA 表达分别是 A 组的 4.98±0.85、5.16±0.78、9.31±0.82、4.42±0.44、5.63±0.72 倍，差异有统计学意义(P＜0.01），差异均有统计学意义(均 P＜0.01)；C 组肺泡巨噬细胞 TLR2、TLR4、TLR9、MyD88、NF-κΒ mRNA 表达分别是 B 组的4.72±1.10、5.05±1.07、8.96±1.05、4.34±0.56、5.8±0.98 倍，差异有统计学意义(P＜0.01）。  
结论  肺泡巨噬细胞 TLR2,4,9-MyD88 信号通路参与并介导了机械通气所致的肺损伤。  
关键词 机械通气，肺泡巨噬细胞，Toll 样受体，髓样分化因子 88，信号通路

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