[硕士论文] 鹅源新城疫病毒的分离鉴定及其疫苗的研制 [复制链接]

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硕士论文-鹅源新城疫病毒的分离鉴定及其疫苗的研制，共69页，36042字

摘要

鹅感染新城疫（Newcastle disease，ND）最早于 1997 年在华南和华东部分地区

被发现，由于当时对该病没有引起足够的重视，导致在很短的时间内就在全国大部分

地区大面积流行,已成为危害养鹅业的又一主要病毒性疾病。

本试验选择从不同的发病鹅场分离到的2株鹅源新城疫毒株，对其进行了一系列生

物学特性鉴定。结果显示：（1）两毒株都具有血凝活性,透射电镜下观察到的病毒粒

子与鸡新城疫病毒粒子形状和大小相同。根据测定的鸡胚平均死亡时间(MDT)，1日龄

雏鸡脑内接种致病指数(ICPI)和6周龄鸡静脉接种致病指数（IVPI）的结果判断，此2

毒株属于新城疫强毒范畴； 2）通过对鹅的人工攻毒试验可知，病死鹅以内脏器官的

广泛性出血和坏死为主要特征，很难从临床症状、剖检变化和组织学病变上同鸡感染

NDV的相区别； 3）F基因的遗传变异性分析试验发现，2株鹅源NDV与国内标准强毒株

F48E8的同源性分别为86.2％和85.2％；与传统疫苗株LaSota的同源性仅为84.3％和

82.6％，说明此两毒株与传统的强毒株和疫苗株存在明显差异，而与流行株CH2000

和TW2000的同源性都在95%以上，所以鹅源新城疫与近年来新城疫流行毒株有较近的

亲缘关系。通过对F基因片段核苷酸序列推导出的氨基酸序列的分析发现，NDV01、

NDV02的F基因裂解位点的氨基酸序列皆为112R-R-Q-K-R-F117,特别是K101和V121，具备

了NDV F基因VII型的典型特征。（4）用鹅源NDV01、NDV02研制成二联油乳剂灭活

苗的免疫试验结果显示，其免疫效果优于普通新城疫疫苗。

结论：2株鹅源新城疫病毒与鸡新城疫病毒属于同种病毒，而不是一种新病毒，只

是毒力更强，可引起鹅发病死亡。

关键词：鹅源新城疫病毒；生物学特性；F 基因；疫苗；病理切片

目录

符号说明1

前言……3

中文摘要5

英文摘要6

文献综述

第一章

新城疫的流行病学…………………8

1 世界流行概况………8

2 新城疫在我国的发生和研究概况………9

3 新城疫的生态学 …10

4 新城疫流行形式改变的原因分析 ……11

5 新城疫在鸭鹅等水禽中的流行状况……12

第二章

新城疫病毒概述 …………………15

1 新城疫病毒的生物学特性 ……………15

2 F 蛋白的致病作用 17

3 诊断及防制 ………19

试验研究

试验一

试验二

鹅源 NDV 的分离鉴定 ………………22

材料 ……………22

方法 ……………22

结果 ……………28

讨论 ……………37

鹅源 NDV 感染鹅组织学变化研究…39

1 材料…………… 39

2 方法…………… 39

3 结果…………… 40

4 讨论…………… 42

试验三 鹅源 NDV 油乳剂灭活苗的研制……… 43

1 材料………………43

2 方法………………43

3 结果………………43

4 讨论………………44

结 论

参考文献 …………………47

附图一

附图二

病死鹅剖检变化 54

鹅源 NDV 的病理组织学光镜观察结果 …………………55

附录

溶液的配制 ……60

致谢 62

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