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lyb198473 - 2019/12/15 12:12:45
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适用专业:微生物学
适用年级:大学
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论文编号:216642

资料简介:
肿瘤相关抗原及其抗体抑瘤作用的研究,博士学位论文,共81页,附答辩文稿。
摘 要
本研究目的是筛选新的肿瘤靶抗原,研制用于肿瘤诊断和肿瘤靶向治疗的抗体。与基因差异显示及消减杂交等筛选肿瘤靶抗原的策略不同,本研究利用抗体差异筛选法发现和鉴定肿瘤特异抗原,通过细胞及动物实验评价肿瘤抗原及其抗体在肿瘤诊断和治疗中的意义。
在以结直肠癌细胞系LS 174T的活细胞为抗原免疫小鼠得到的单克隆抗体中,通过ELISA及免疫组化等方法筛选出一株肿瘤相关的单克隆抗体CC4;用生化及细胞免疫荧光等方法对其抗原的鉴定结果表明,CC4抗原是一个130 kDa的CEA相关蛋白。体外实验表明,抗体CC4可以抑制肿瘤细胞的增殖、黏附和迁移。荷人瘤小鼠动物实验表明抗体CC4对LS 174T结直肠癌肿瘤生长具有明显的抑制作用,抑制率为57.26%,显示了CC4具有成为肿瘤治疗性抗体的潜在应用价值。为了构建人源化CC4抗体,通过RT-PCR的方法克隆了CC4抗体可变区的编码基因,并构建了其scFv,为抗体CC4的应用奠定了基础。
T2-2是以LS 174T细胞的裂解物为抗原免疫小鼠得到的一株单克隆抗体,该抗体具有三个特点:(1)特异识别分子量为46 kD的细胞角蛋白;(2)抗体T2-2不同于其它抗细胞角蛋白抗体(多数抗体通常与多种细胞角蛋白交叉反应),该抗体只识别46 kD细胞角蛋白多肽上的单一抗原表位,与其它细胞角蛋白没有交叉反应;(3)单克隆抗体T2-2适用于多种免疫实验技术,包括ELISA、免疫组化、细胞免疫荧光及Western Blot等,而且适用于多种固定剂。以上结果表明,单克隆抗体T2-2将成为细胞角蛋白功能研究和肿瘤诊断的有力工具。
在SARS流行期间,以灭活的SARS-CoV完整病毒颗粒为抗原,用固相筛选法从大容量的天然人抗体库中筛选到一株SAR-CoV特异性的scFv,对基于抗体的SARS的诊断和防治具有应用价值。
关键词:肿瘤相关抗原,单克隆抗体,SARS冠状病毒

目录
前 言  1
第一部分 肿瘤靶抗原及抗体靶向治疗  1
第二部分 肿瘤标志物CEA, CK及其抗体靶向治疗  9
研究工作  18
第一章 新型抗CEA单克隆抗体CC4的抗肿瘤作用  18
1.材料与方法  18
2.结果  23
3.讨论  32
第二章 新型抗细胞角蛋白单克隆抗体T2-2的抗肿瘤作用  35
1.材料与方法  35
2.结果  40
3.讨论  52
第三章 从人天然抗体库中筛选抗SARS-COV抗体  55
1.引言  55
2.材料与方法  57
3.结果  59
4.讨论  61
参考文献  63
发表文章目录  74


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