资料简介：
细胞黏附分子CD146的研究——在自身免疫疾病中的表达以及CD146的分子亚型，博士学位论文，共64页，附答辩文稿。
摘要
作为新发现的内皮细胞黏附分子，CD146 还有很多未知有待探索。本研究的主要目的是研究CD146 在慢性炎症——血管炎、系统性红斑狼疮以及脱髓鞘病中的作用，同时研究膜结合形式CD146 的亚型。研究分三部分展开：
1. 本研究首次从膜结合形式CD146 和可溶性CD146(sCD146)两个方面来研究CD146 在血管炎和系统性红斑狼疮患者中的动态表达以及临床意义。实验结果显示外周血白细胞膜上的CD146 表达，而不是血清sCD146 水平，能够反应出血管炎和SLE 患者疾病进程，并有可能预测预后情况。CD146 在患者活动期白细胞上的表达仅限于外周血白细胞，在渗透到组织中的白细胞上CD146 表达缺失，显示CD146 发挥作用的时空定位。体外实验证实CD146 在白细胞表面是可诱导表达，与临床检测结果趋势一致。文献报道血管内皮细胞表达CD146 配体，健康人淋巴细胞亚群表达CD146 分子，综合本研究所得结果，CD146 在活动期患者循环的白细胞上的诱导表达很可能介导白细胞与血管内皮之间的相互作用，并且这种诱导表达为监控疾病进程及预后的提供新的靶标。
2. 由于目前商品化检测sCD146 的ELISA 试剂盒不够灵敏，无法对脱髓鞘病患者脑脊液中sCD146 定量。本研究采用基于光学椭偏光成像技术的蛋白质芯片来检测脑脊液样品种sCD146 的含量。该方法有样品用量少，样品无需任何标记物，检测速度快等优点。实验结果表明该方法可以灵敏检测脑脊液样品中sCD146 含量，检测极限为0.2ng/ml，比商品化的ELISA 试剂盒(检测极限100/ml)灵敏500 倍，可以用于脑脊液样品sCD146 的检测。
3. 本研究首次发现三个分子量的CD146：CD146130 （130kDa）、CD146110(110kDa)和CD14697(97kDa)。三个分子量的糖基化以及分布各不相同。三个分子量CD146 在血管系统中的表达：CD14697 大量表达于血管平滑肌上，同时CD14697可以形成天然二聚体，显示了CD146-CD146 之间的相互作用；CD146110 在正常组织上的表达仅限于某些血管内皮细胞上，但在肿瘤血管上大量表达，反映CD146110 在血管生成中起作用。CD146130 与前两个分子量的CD146 显著区别是不能够被神经氨酸酶所消化。此外黑色素瘤细胞对CD14697 表达有选择性，预示
CD14697 在黑色素瘤发展中的作用。通过RT-PCR 发现了CD146 的 RNA 剪接，首次分析两个剪接产物的序列。
关键词：细胞黏附分子，CD146 亚型，自身免疫病，光学椭偏光成像
目录
中文摘要……… I
英文摘要……… II
目录… IV
文献综述细胞黏附分子及细胞黏附分子 D146….…….……… 1
材料与方法…… 15
实验结果与讨论 21
第一部分：黏附分子CD146 在血管炎中的作用…….. 21
1. 患者临床背景………...….…... 21
2. CD146 在血管炎和SLE 患者外周血白细胞上的动态表达及
临床意义.. 22
3. 血液外渗到组织中的炎细胞上CD146 表达的缺失………. 25
4. sCD146 在患者血清中的动态变化….… 26
5. CD146 在健康人外周血PMN 的诱导表达——活动期血管炎
患者血清刺激以及PSL 的作用…….…. 30
第二部分光学蛋白质芯片在检测脱髓鞘病患者脑脊液 sCD146 中的应用
——方法的建立……… 33
1. ELISA 对活动期MS 和GBS 患者以及正常人血清中sCD146
进行定量分析……… 33
2. 光学蛋白质芯片定量检测患者脑脊液中sCD146……..…... 34
第三部分 CD146 亚型的研究……..……..… 37
1. 三个分子量CD146 亚型的存在….…..... 37
2. CD146110 在肿瘤血管上过量表达……… 38
3. 三个分子量CD146 存在不同的唾液酸化….……. 41
4. CD146 转录水平上剪接……… 43
参考文献……… 49
文章发表……… 57
致谢… 58
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